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          polyplus轉(zhuǎn)染試劑 jetPRIME®應用

          更新時間:2023-06-28點擊次數(shù):2544

          polyplus轉(zhuǎn)染試劑 jetPRIME®應用

          polyplus轉(zhuǎn)染試劑 jetPRIME®是一種功能強大、用途廣泛的DNA和siRNA轉(zhuǎn)染試劑,用于日常實驗,可產(chǎn)生高效可靠的科學結(jié)果。jetPRIME®確保在各種粘附細胞中具有高的DNA轉(zhuǎn)染效率和優(yōu)異的基因沉默。jetPRIME®也是DNA/siRNA共轉(zhuǎn)染或幾種質(zhì)粒共遞送的理想選擇。此外,jetPRIME®試劑對細胞非常溫和,因為它在轉(zhuǎn)染過程中需要少量的試劑和核酸。

          polyplus轉(zhuǎn)染試劑 jetPRIME®應用方向多樣,主要的應用方向如下:

          一、質(zhì)粒轉(zhuǎn)染

          jetPRIME®導致不同來源的轉(zhuǎn)染粘附細胞系以及原代細胞的百分比非常高,如下表:

          細胞類型

          細胞系

          描述

          轉(zhuǎn)染效率

          上皮細胞

          B16-F10

          小鼠黑色素瘤

          70-80%


          BNL-CI2

          小鼠正常胚胎肝細胞

          50-60%


          CaCO2

          人結(jié)腸癌上皮

          20%


          CHO-K1

          中國倉鼠卵巢

          70%


          HCT-116

          人結(jié)腸癌

          70%


          Hela

          人宮頸上皮樣癌

          70-90%


          Hepg2

          人肝癌

          50-70%


          Huh-7

          人肝癌

          30-50%


          MCF-7

          人乳腺腺癌

          50%


          MCF-10A

          人乳腺腺癌

          40-50%


          MDCK

          犬腎上皮

          20%


          PC-3

          人類前列腺癌

          70%


          Vero

          非洲綠猴腎

          50%

          成纖維細胞

          COS-7

          非洲綠猴腎

          60-80%


          HEK-293

          人胚腎成纖維細胞

          80-90%


          MRC-5

          人胚肺成纖維細胞

          50%


          NIH-373

          小鼠胚胎成纖維細胞

          50-70%

          成髓細胞

          Raw 264.7

          小鼠單核巨噬細胞

          40-50%

          成肌細胞

          C2C12

          鼠成肌細胞

          70-90%

          神經(jīng)元

          SH-SY5Y

          人類神經(jīng)母細胞瘤

          70-80%

          原發(fā)性肝細胞

          人原代肝細胞

          20-30%

          原發(fā)性黑色素細胞

          人原代黑素細胞

          40-50%

          表1:使用jetPRIME®的各種細胞類型的轉(zhuǎn)染效率。轉(zhuǎn)染后24小時通過FACS分析測定GFP陽性細胞的百分比。

          質(zhì)粒是常見于細菌中的環(huán)狀DNA小分子。質(zhì)粒與染色體DNA分開存在和復制,在細菌中,質(zhì)粒通常攜帶有利于細菌生存的基因。質(zhì)??梢员挥幸獾匾胨璧募毎校⒂糜谠谔囟毎抵羞^表達感興趣的基因。這一過程被稱為DNA轉(zhuǎn)染,是研究感興趣的基因功能或蛋白質(zhì)的常用方法。

          二、基因編輯

          CRISPR/Cas9系統(tǒng)在哺乳動物細胞中的使用最近已經(jīng)成為在特定基因座修飾細胞基因組的一種非常方便的方法。它涉及將(a)編碼Cas9的一個或多個質(zhì)粒、特異性gRNA和最終要插入的序列,或(b)一個或兩個質(zhì)粒和RNA分子(gRNA)的混合物瞬時轉(zhuǎn)染到哺乳動物細胞中。

          三、siRNA轉(zhuǎn)染

          jetPRIME®可使多種細胞系的內(nèi)源性基因表達降低90%以上。例如,jetPRIME®介導的用靶向HeLa細胞中內(nèi)源性層粘連蛋白A/C的10nM siRNA雙鏈體轉(zhuǎn)染HeLa細胞,將層粘連蛋白/C基因表達顯著降低到幾乎無法檢測的水平。

          image.png

          圖1:使用jetPRIME®的內(nèi)源性層粘連蛋白A/C沉默。用10nM的21-mer層粘連蛋白A/C siRNA轉(zhuǎn)染HeLa細胞。48小時后,使用抗層粘連蛋白A/C的抗體通過免疫熒光顯微鏡評估層粘連蛋白/C沉默。

          四、不同核酸的共轉(zhuǎn)染

          jetPRIME®非常適合DNA和siRNA/miRNA共轉(zhuǎn)染實驗或幾種DNA質(zhì)粒的共遞送,用jetPRIME®進行了DNA和siRNA

          送,并在各種毒性極低的細胞系中觀察到高效的基因沉默。使用10nM的siRNA,在貼壁細胞中實現(xiàn)了超過90%的沉(圖2)。

          image.png

          圖2:使用jetPRIME®進行DNA和siRNA共轉(zhuǎn)染后,幾種細胞系中的外源性螢光素酶沉默。在6孔板中用每孔400ng p4CMV Luc和10nM熒光素酶siRNA進行實驗。

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          polyplus轉(zhuǎn)染試劑 jetPRIME®代理——天津益元利康生物科技有限公司,成立于2018年,坐落于天津經(jīng)濟技術(shù)開發(fā)區(qū)。公司產(chǎn)

          品線涉及細胞與基因治療、免疫學、分子生物學、細胞生物學等多個方向,專注于生命科學試劑、耗材、細胞、儀器等產(chǎn)品銷售

          ,經(jīng)營的品牌主要有:ThermoFisher、Sigma、Qiagen、EZBioscience、ZYMO Research、MedKoo、Abcam、polyplus等等。我們提

          供質(zhì)優(yōu)價美的產(chǎn)品、及時到位的服務(wù),努力成長為生命科學和生物技術(shù)企業(yè)的優(yōu)質(zhì)供應商。



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