超濾離心管操作步驟

超濾離心管操作步驟一：準備工作

從4°C冰箱中取出超濾管，使其恢復(fù)至室溫（約15-30分鐘），以防止冷膜在離心過程中破裂。

準備樣品：確保樣品已充分混勻，無大的不溶性顆粒物，以免堵塞膜孔。如有必要，可先進行離心或過濾預(yù)處理。

預(yù)冷離心機：將離心機預(yù)冷至4°C（除非您的樣品有特殊要求），以減少蛋白質(zhì)變性和降解。

佩戴手套：操作全程佩戴手套，防止皮膚油脂污染膜或樣品。

超濾離心管操作步驟二：預(yù)處理/潤洗膜 (重要步驟！)

向樣品室中加入適量預(yù)冷的超純水或目的緩沖液（通常加至最大容量的一半以上）。

蓋上蓋子，在指定離心力下離心1-2分鐘。

棄去濾出液。此步驟可以去除膜孔中的保護劑（如甘油），并激活膜孔，提高回收率和流速。

超濾離心管操作步驟三：加入樣品

將預(yù)處理的超濾管放入一個新的收集管中。

用移液器將樣品加入樣品室中。注意：不要超過最大標定體積，以免樣品溢出污染濾膜外側(cè)。

平衡：如果同時處理多個樣品，務(wù)必在天平上用水配平至重量一致，以確保離心機平穩(wěn)運行。

超濾離心管操作步驟四：離心濃縮

蓋上蓋子（如果蓋子有功能孔，確保其暢通）。

根據(jù)說明書推薦的離心力（× g）和時間進行離心。切勿使用制動（brake）功能，以免產(chǎn)生的負壓破壞膜結(jié)構(gòu)。

起始離心條件參考：通常為2000-4000 × g，離心10-30分鐘。具體條件需根據(jù)樣品粘度、濃度和目標濃縮倍數(shù)進行調(diào)整。

離心后，檢查濾出液的體積。如需進一步濃縮，可棄去濾出液，將樣品室放回收集管中繼續(xù)離心。

超濾離心管操作步驟五：樣品回收

方法一（常規(guī)回收）：離心完成后，小心地將超濾管倒扣在一個新的收集管上。以1000 × g 離心 1-2 分鐘，即可將濃縮的樣品回收至收集管中。

方法二（移液器回收）：對于小體積樣品，可用移液器小心地吹打膜表面多次，將粘附的濃縮樣品吸下收集。注意：切勿用移液器jianduan觸碰或刺破超濾膜！

超濾離心管操作步驟六：清洗與保存

立即用大量超純水沖洗樣品室和膜，防止樣品殘留干涸堵塞膜孔。

短期保存：可浸泡在超純水或20%乙醇中，于4°C存放。

長期保存：清洗后，干燥，室溫避光保存。

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