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          當前位置:首頁技術文章qiagen凱杰EndoFree Plasmid Giga Kit(12391)介紹

          qiagen凱杰EndoFree Plasmid Giga Kit(12391)介紹

          更新時間:2024-01-30點擊次數:1114

          EndoFree Plasmid Kits基于陰離子交換技術,可快速制備不含內毒素的質粒DNA。QIAfilter Cartridges過濾快速澄清裂解液。制備的DNA純度超過兩次CsCl梯度離心法所得DNA的純度,適合超轉染級純的應用。EndoFree Plasmid Buffer Set可用于制備10次mega規模或5次giga規模轉染級純質粒或科斯質粒DNA制備。

          EndoFree Plasmid Kit將高效的內毒素去除步驟整合到質粒純化流程中,不需要額外步驟,也不需用親和柱去除脂多糖。通過QIAfilter Mega-Giga Cartridge過濾細菌裂解液,并使用重力流QIAGEN-tip陰離子交換柱純化質粒DNA。產量可達10 mg(Giga)、2.5 mg(Mega)、500 μg(Maxi)DNA。純化的DNA無內毒素(<0.1 EU/μg DNA)。

          EndoFree Plasmid Kits去除細菌在裂解過程中釋放的內毒素,內毒素會影響原代細胞和敏感培養細胞的DNA轉染。從EndoFree Plasmid Kits得到的無內毒素DNA高度適用于可重復且結果可靠的轉染。QIAGEN超純無內毒素DNA也適用于基因治療研究和其他敏感應用。

          在堿性條件下,細菌細胞裂解,使用QIAfilter Mega-Giga Cartridge清除粗裂解物。將Endotoxin Removal Buffer加入到過濾后的裂解液中。冰浴后,將純凈的裂解物上樣到陰離子交換柱上,在適當的低鹽和pH條件下,質粒DNA選擇性結合。用中鹽緩沖液清除RNA、蛋白質、代謝產物和其他低分子量雜質,超純質粒DNA被高鹽緩沖液洗脫。最后DNA由異丙醇脫鹽、沉淀并且離心回收。

          使用EndoFree Plasmid Kits純化的DNA適合多種敏感應用,包括:

          1. 轉染,包括原代、敏感以及懸浮細胞

          2. 基因治療研究

          3. 基因沉默

          4. 顯微注射

          產品優勢:

          1. 純化得到的DNA內毒素水平低于0.1 EU/μg

          2. 純化流程快,同時去除內毒素

          3. 獲得高產量、高拷貝質粒DNA

          4. 使用LyseBlue,獲得最佳的裂解和高產量的DNA

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