PCR/qPCR耗材選擇——材料及顏色篇

目前市場上大多數PCR/qPCR管材選用的是聚丙烯材料。聚丙烯是一種惰性的有機材料，對反應物質的吸收值最小，并且聚丙烯可以承受PCR過程中的溫度變化，在經過溫度變化后不易變形，因此可以確保獲得最佳的PCR結果。

在生產過程中，為了保證生物兼容性、純度以及批次間的一致性，應當使用全新的醫學級的分子生物學級別的高品質的聚丙烯作為原料進行生產。有些PCR / qPCR板為了配合高通量機器人的操作，需要具有更高強度的邊框來配合機器人的抓取，通常情況下邊框的材料使用的是更高強度的聚碳酸酯。

在某些PCR過程中，如數字PCR，對于耗材的選擇更為嚴苛。由于數字PCR使用的是有限稀釋檢測法，因此在操作配樣的過程中如果樣品吸附在槍頭或管壁上，將會造成樣本的缺失，從而造成結果的偏差。對于樣本稀缺且珍貴的實驗中，低吸附度的耗材可以減少材料的損耗，并且可以保證PCR實驗的準確性。因此低吸附度的耗材贏得了研究學者的青睞。

PCR管/板有多種顏色，如透明色、白色、黃色、藍色、紅色……普通的PCR過程中，管/板的顏色并不會影響PCR的結果，但是在qPCR中，管/板的顏色對于結果是有很大的影響的。

應用于qPCR的耗材，一般是白色或者磨砂的塑料耗材。qPCR在DNA擴增反應中，以熒光化學物質測每次PCR循環后產物總量，因此與透明塑料管/板相比，白色或磨砂的管/板在應對熒光時表現更為靈敏，并且結果更加準確。這是因為白色的耗材可以阻止熒光折射出管，達到熒光折射的最小化，將更多的熒光信號反射回檢測器，從而增加信噪比，表現為更高的靈敏度；另外，白色管壁也可阻止熒光信號被PCR儀的加熱模塊吸收或進一步反射，從而可以降低重復實驗中的誤差，提高準確性。除此之外，在進行qPCR時需使用超透明的管蓋或光學密封膜來密封PCR管/板，保證熒光不受干擾；還需要參考qPCR的耗材要求，選擇最合適的耗材，達到想要的實驗效果。